【关键词】粪便隐血试验 单克隆抗体法 联苯胺法
【Abstract】Objective Detection of fecal occult blood test combined clinical study. Methods Using monoclonal antibody and benzidine method for analysis of fecal occult blood test.Results Monoclonal antibody-positive rate of less than benzidine positive rate law. Conclusion Fecal occult blood test to check chemical and immunoassay should be combined to increase the positive detection rate and reduce false positive and false negative results.
【Key words】Fecal occult blood test monoclonal antibody benzidine method
粪便隐血试验(fecal occult blood test,FOBT)对消化道出血的诊断及消化道恶性肿瘤的筛查有重要的参考价值。根据原理大致分为化学法和免疫法两大类其中化学法邻联甲苯胺法为1983年中华医学会全国临床检验方法学学术讨论会推荐的方法,但易出现假阳性[1]近年来发展的单克隆抗体免疫一步法得到了越来越广泛的应用[2],有逐步完全取代化学法的趋势,本文对单克隆抗体法和联苯胺法的粪便隐血试验结果进行对比分析, 现将结果报道如下:
1 材料与方法
1.1 试剂
1.1.1 化学法由珠海贝索公司提供。
1.1.2 单克隆金标法由万华普曼生物工程有限公司提供。
1.2 粪便隐血的操作法
1.2.1 化学试剂带的操作方法见试剂盒的说明。
1.2.2 单克隆金标粪便隐血一步检验法,操作方法见试剂说明书。
1.3 标本来源 收集住院诊患者粪便150份。
1.4 统计学方法 本次试验资料均为计数资料结果。
2 结果
表1 单克隆抗体法与联苯胺法粪便隐血结果的比较
3 讨论
用两种方法检测粪便隐血的研究,化学法粪便隐血实验是利用血红素有过氧化物酶的特性,能催化过氧化物,放出新生态氧,与色原性底物反应而显色。
但凡是具有过氧化物酶特性的食品、药物如铁剂、铋剂、中药及治疗幽门螺旋杆菌的药物德诺均可造成粪便呈黑色、维生素C、过氧化物酶、各种动物的肉、血、肝脏富含叶绿素食品等均可产生此化学反应,产生干扰,造成假阳性,假阳性率高达30%[3]。因此检测前须禁食肉类及相关药品及食品三天.且特异性低,而且联甲苯胺为强致癌物,对人体危害极大。而单克隆抗体法采用抗人体血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体,特异性针对粪便样品中的人血红蛋白。单克隆抗体法不受动物血红蛋白的干扰,具有高度的特异性和准确性,能确诊消化道是否有出血,且本试验前不须禁食肉类及其它有过氧化物酶的药品及食品。经试验和临床验证,单克隆抗体法对猪、羊等动物血红蛋白液检测隐血均为阴性,对食用猪、羊等动物类血红蛋白的粪便隐血进行测试.结果亦为阴性[4]。而传统的粪便隐血实验则为阳性。单克隆法可测出样本中微量的血红蛋白(0.21ug/m1)[5]这使得单克隆法对人体无症状的消化道出血更敏感传统的粪便隐血试验对人血红蛋白浓度在0.2~0.9ug/ml时均为阴性 当达到1.0ug/ml时才阳性.这说明它对人体无症状的消化道出血不及单克隆法敏感并有相当一部分阳性便样被漏掉 因此采用单克隆法检测粪便隐血更有助于早期发现肿瘤性消化道出血,特别是早期结肠、直肠癌,粪便中带有癌肿的微量出血是早期可以查的唯一异常现象。 免疫胶体金法只特异地针对人血红蛋白抗原表位,基本排除饮食和药物干扰,灵敏度与特异性均优于传统化学法,迄今尚未有假阳性的案例报道[6],故被WHO和世界胃肠镜检查协会推荐做粪便隐血试验的一种较为确认的方法[7]。但胶体金试验也存在不足之处,当临床出现消化道大出血患者大便往往呈柏油样便或血便,此时用胶体金试纸检测往往呈假阴性,因为试纸条所包被的抗体量是一定的,那么一旦超出检测范围就会出现假阴性[8],这就是所谓的粪便隐血试验的后带现象。我们可以将标本进行一定倍数的稀释后,再用胶体金法检测,或联合化学法同时检测。另外,一部分上消化道出血或口腔出血的患者,由于血红蛋白在消化道内存留的时间太长,被肠道内细菌分泌的酶所降解,使其免疫原性被破坏而失去与抗体结合的能力,可导致假阴性的结果。还有少数粪便标本在含一定量蛋白时潜血呈阴性 [9],当除去蛋白后结果呈阳性。像其他检测方法一样,便隐血胶体金检测不能对胃肠道出血性病变做结论性的诊断,只能作为筛查或辅助诊断用,对于阳性结果,应结合临床做进一步的检查。
美国癌症协会建议[10-12] 对 50岁以上人群进行粪便隐血检查,如出现化学 法阳性时则建议加做IFOBT以帮助对消化道出 血的定位,决定进一步需进行何种内镜检查 [13].
故检验科室应与临床医师加强沟通对于粪便隐血试验的检查应将化学法和免疫法联合应用以提高阳性的检出率,降低假阳性和假阴性结果。
参 考 文 献
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